«Биология. Экология» 2011 4

Характеристика антигенного комплекса, извлекаемого термоэкстракцией из клеток бруцелл в L-форме

Авторы: К. Ю. Ястремская, Е. Ю. Марков, В. Б. Николаев, Л. М. Михайлов, А. И. Калиновский, Н. Л. Баранникова
Аннотация:

Методом термоэкстракции получен антигенный комплекс из клеток бруцелл в L-форме, дана характеристика его химического состава. Проведено электрофоретическое фракционирование полученного антигенного комплекса в блоках полиакриламидого геля в присутствии додецилсульфата натрия. С помощью иммуноблоттинга показано, что иммунохимической активностью обладала диффузная белковая фракции с молекулярной массой от 67,5 до 75,5 кДа. Показана высокая активность и специфичность антигенного комплекса в реакции иммунодиффузии и реакции кольцепреципитации.
Ключевые слова: бруцеллы, L-форма, термоэкстракт, антигенный комплекс
УДК: 616.981.42, 577.1; 616.013; 612.017
Литература: 1. Безопасность работы с микроорганизмами I–II групп патогенности (опасности): СП 1.3.1285-03 – М., 2003. – 85 с.
2. Бруцеллёз сельскохозяйственных животных / И. А. Косилов [и др.]. – Новосибирск, 1999. – 344 с.
3. Гусев А. И. Микрометод преципитации в агаре / А. И. Гусев // Иммунохимический анализ / под ред. Л. А. Зильбер. – М., 1968. – С. 99. 4. Методические рекомендации по контролю специфической стерильности биологических препаратов, приготовленных из бруцелл / О. С. Петухова [и др.]. – Иркутск, 1987. – 4 с.
5. Методические рекомендации по получению гипериммунной кроличьей сыворотки против бруцелл в L-форме / Л. М. Михайлов [и др.]. – Иркутск, 2005. – 4 с.
6. Никитин В. М. Справочник методов иммунологии / В. М. Никитин; под ред. М. В. Бочкарева. – Кишинёв, 1982. – 304 с.
7. Пат. 2416429 RU МПК G 01 N 33/531. Способ получения антигенного препарата из бруцелл в L-форме / Л. М. Михайлов [и др.]; заявитель и патентообладатель ФГУЗ Иркутск НИПЧИ Сибири и ДВ Роспотребнадзора – № 2009120812/15; заявл. 01.06.2009; опубл. 20.04.2011, Бюл. № 11.
8. Спирин А. С. Спектрофотометрическое определение суммарного количества нуклеиновых кислот / А. С. Спирин // Биохимия. – 1958. – Т. 23, вып. 5. – С. 656–662.
9. Триленко П. А. Бруцеллёз сель скохозяйственных животных / П. А. Триленко. – Л., 1976. – 280 с. 10. Хансон Р. Химический состав бактериальной клетки / Р. Хансон, Дж. Филлипс // Методы общей бактериологии : пер. c англ. : в 3 т. – М., 1984. – Т. 2. – С. 283–373.
11. Cutler S. J. Brucellosis – new aspects of an old disease / S. J. Cutler, A. M. Whatmore, N. J. Commander // J. of Applied Microbiology. – 2005. – Vol. 98, N 6. – P. 1270–1281
12. Hatten B. A. Intracellular Production of Brucella L Forms / B. A. Hatten, S. E. Sulkin // J. of Bacteriology. – 1966. – Vol. 91, N 1. – P. 285–296. 13. Laemmli U. K. Maturation of the head of bacteriophage T4. I. DNA packaging events / U. K. Laemmli, M. Favre // J. Mol. Biol. – 1973. – Vol. 80, N 4. – P. 575–599.
14. McKinney M. M. A simple, nonchromatographic procedure to purify immunoglobulins from serum and ascites fluid / M. M. McKinney, A. Parkinson // J. of Immunological Method. Elsevier. – 1987, N 96. – P. 271–278.
15. Protein measurement with the Folin phenol reagent / O. H. Lowry [et al.] // J. Biol. Chem. – 1951. – Vol. 193, N 1. – P. 265–275.
16. Towbin H. Electrophoretic transfer of proteins from polyacrylamide gels to nitrocellulose sheets: procedure and some applications / H. Towbin, T. Stachelin, J. Gordon // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. – 1979. – Vol. 76, N 9. – P. 4350–4354.
17. Ultrastructure of Brucella abortus L-Forms Induced by Penicillin in a Liquid and in a Semisolid Medium / B. A. Hatten [et al.] // J. of bacteriology. – 1969. – Vol. 99, N 2. – P. 611–618.