«Биология. Экология» 2008 2

Термофильная и алкалофильная бактерии из экстремальных водных экосистем Бурятии – продуценты внеклеточных протеаз

Авторы: Е. В. Лаврентьева, А. П. Шагжина, А. А. Раднагуруева, Б. Б. Намсараев, Я. Е. Дунаевский
Аннотация:

Была изучена динамика накопления протеолитической активности в процессе роста культур П1
и Ц3 в зависимости от источника азота. Культуры выделены из донных осадков гидротермы пос. Горячинск
и содово-соленого озера Соленое. Штаммы активно продуцируют протеазу, гидролизующую специфичный
для субтилизинподобных протеиназ синтетический субстрат ГААЛП, наибольшая активность наблюдается
на 24-й час роста культур. Протеазы стабильны при температуре 40–50 оС и рН 6,0–11,3. Ингибиторный
анализ показал, что при добавлении до 1 мМ ФМСФ наблюдается полное ингибирование протеолитической
активности. Данные ингибиторного анализа и субстратной специфичности наиболее активных внеклеточ-
ных протеаз штаммов П1и Ц3 указывают на их принадлежность к классу сериновых протеаз субтилизинпо-
добного типа.
Ключевые слова: протеазы, протеолитическая активность, субстратная специфичность, ингибиторный анализ
УДК: 577.151.01
Литература: 1. Котлова Е. К. Сериновая тиолзависимая про-теиназа Paecilomyces lilacinus: выделение и свойст-ва / Е. К. Котлова [и др.] // Биохимия. – 2007. –Т. 72, вып. 1. – С. 137–144.
2. Маликова Л. А. Условия биосинтеза внекле-точной субтилизиноподобной протеиназы Bacilluspumilus KMM 62 / Л. А. Маликова[и др.] // Микробиология. – 2007. – Т. 76, вып. 3. –С. 313–320.
3. Михайлова Е. О. Выделение и характеристи-ка субтилизиноподобной протеиназы Bacillusintermedius, секретируемой рекомбинантным штам-мом Bacillus subtilis AJ 73, на разных фазах ростабацилл / Е. О. Михайлова [и др.] // Биохимия. –2007. – Т. 72, вып. 2. – С. 228–235.
4. Erlanger B. F. Proteinases activity in biologicalsubstrats / B. F. Erlanger, N. Kokowsky, W. Cohen //Arch. Biochem. Biophis. – 1961. – Vol. 95. – P. 271–278.
5. Habeeb T. S. Determination of free aminogroups in proteins by trinitrobenzenesulfonic acid /T. S. Habeeb // Analyth. Biochem. – 1966. – Vol. 14. –P. 328–336.
6. Sunna A. Identification of Bacillus kaustophilus,Bacillus thermocatennulatus and Bacillus strainHSR as members of Bacillus thermoleovorans /A. Sunna [et al.] // System. Appl. Microbiol. – 1997. –Vol. 20. – P. 232–237.
7. Ward O. P. Proteolytic enzymes / O. P. Ward //In. M. Moo-Young Editor. Comprehencive Biotechnol,1985. – Vol. 3. – P. 789–818.
8. Zeikus J. Thermozymes: Biotechnology andstructure-function relationship / J. Zeikus, C. Vielle,A. Savchenko // Extremophiles. – 1998. – Vol. 1. –P. 179–183.